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產(chǎn)品型號(hào):
所屬分類(lèi):小鼠細(xì)胞
產(chǎn)品時(shí)間:2023-12-21
簡(jiǎn)要描述:小鼠小腸內(nèi)分泌細(xì)胞STC-1我公司以客戶為核心,以產(chǎn)品質(zhì)量求生存,以售后服務(wù)求信譽(yù)。我們通過(guò)不斷改進(jìn)來(lái)提高效率,絕不以犧牲品質(zhì)作為代價(jià)?!罢\(chéng)信、創(chuàng)新、嚴(yán)謹(jǐn)、專(zhuān)業(yè)"愿以飽滿的熱情期待各界朋友攜手合作,共創(chuàng)輝煌!
小鼠小腸內(nèi)分泌細(xì)胞STC-1
產(chǎn)品名稱(chēng):小鼠骨髓瘤細(xì)胞
規(guī)格:1×106 T25/瓶
培養(yǎng)條件:DMEM+10%FBS+1%P/S
生長(zhǎng)狀態(tài):貼壁生長(zhǎng)
相關(guān)細(xì)胞如下
小鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞 AML-12 D/F12+10%FBS+1%ITS(10ug/mL胰島素;轉(zhuǎn)鐵蛋白5.5ug/mL; 5ng/mL硒)+40ng/ml地塞米松+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠氣道平滑肌細(xì)胞 ASMC 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞 G422 DMEM+10%FBS+1%P/S 懸浮生長(zhǎng)
小鼠精原細(xì)胞系 GC-1 spg DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 MAEC M199+5%FBS+5ng/ml VEGF+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠骨樣細(xì)胞 MLO-Y4 MEMa+5%FBS+5%小牛血清+1%P/S 鼠尾膠原包被 貼壁生長(zhǎng)
小鼠肺上皮細(xì)胞 MLE-12 DMEM/F12+1%ITS(10ug/mL胰島素;轉(zhuǎn)鐵蛋白5.5ug/mL; 5ng/mL硒)+10nM氫化的松+10nM雌二醇+10mM hepes+ 2mM L-谷氨酰胺+2%胎牛血清 貼壁生長(zhǎng)
小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細(xì)胞 IMCD3 DMEM/F12+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 3T3-L1 DMEM(含NAHCO3 1.5g/L)+10%小牛血清+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠乳腺癌細(xì)胞 4T1 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 4T1+luc 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠巨噬細(xì)胞 Ana-1 1640+10%FBS+1%P/S 懸浮生長(zhǎng)
小鼠黑色素瘤細(xì)胞 B16 1640(或IMDM)+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠黑色素瘤細(xì)胞 B16-F10 DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠黑色素瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 B16-F10+LUC DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠原B細(xì)胞株 BAF3 1640+10FBS+10ng/ml IL-3(鼠源)+1%P/S 懸浮生長(zhǎng)
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 BALB/3T3 clone A31 DMEM+10%FBS+1%P/S 生長(zhǎng)慢傳代密度要大 貼壁生長(zhǎng)
小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株 bEnd.3 DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠胰島素瘤胰島Beta細(xì)胞 Beta-TC-6 DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+15%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞 BV2 DMEM+10%FBS+1% L-谷氨酰胺+1% HEPES+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞 C17.2 DMEM+10%FBS +1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠成肌細(xì)胞 C2C12 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 C3H/10T1/2 Clone8 MEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 CT26 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 CT26+LUC 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 CT26.WT 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠胚胎干細(xì)胞 E14 DMEM+15%FBS+0.1uL/mL LIF+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1%PS+1uL/mLβ-巰基乙醇+1%P/S 培養(yǎng)瓶用0.1%明膠包被細(xì)胞呈集落生長(zhǎng) 貼壁生長(zhǎng)
小鼠淋巴瘤細(xì)胞 EL-4 DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+10%馬血清(或FBS)+1%P/S 懸浮生長(zhǎng)
小鼠乳腺癌細(xì)胞 EMT6 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠膠質(zhì)細(xì)胞瘤 GL-261 DMEM+10%FBS+1% L-谷氨酰胺+1% HEPES+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠膠質(zhì)細(xì)胞瘤熒光素酶標(biāo)記 GL-261+luc DMEM+10%FBS+1% L-谷氨酰胺+1% HEPES+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠乳腺上皮細(xì)胞 HC11 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠肝癌細(xì)胞 HEPA1-6 DMEM(含NaHCO3 1.5g/L+10%FBS+1%丙酮酸納+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠肝癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 HEPA1-6+LUC DMEM(含NaHCO3 1.5g/L+10%FBS+1%丙酮酸納+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞 HT22 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠卵巢上皮癌細(xì)胞 ID8 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠單核巨噬細(xì)胞 J774A.1 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞 K7M2WT (K7M2-wt) DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 K7M2WT(K7M2-WT)-LUC DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠肺癌細(xì)胞 LLC DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠肺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 LLC+LUC DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠淋巴瘤細(xì)胞 L5178Y TK+/- clone (3.7.2C) DMEM+10%FBS+1%P/S 懸浮生長(zhǎng)
小鼠成纖維細(xì)胞 L929 MEM+10%HS(馬血清)+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠胰腺癌細(xì)胞 LTPA MEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 MA-891 1640+10% FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠膀胱癌細(xì)胞 MB49 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 MC38 DMEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1% HEPES+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 MC38+LUC DMEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1% HEPES+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠胚胎成骨細(xì)胞 MC3T3-E1 MEMα+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠顱頂前骨細(xì)胞亞克隆14 MC3T3-E1subclone 14 MEMα(添加NaHCO3 1.5g/L+肌醇 43.2mg/L+葉酸 8.82mg/L+β-巰基乙醇 7.8mg/L)+ FBS 10%+P/S 1% 貼壁生長(zhǎng)
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 MEF D/F12+10%FBS+1%P/S (非永生化) 貼壁生長(zhǎng)
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 MEF(絲霉素C處理) D/F12+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠前胃癌細(xì)胞 MFC 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠正常肝細(xì)胞 NCTC1469(NCTC CLONE 1469) DMEM +10%馬血清+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞 neuro-2a MEM+10%FBS+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠胚胎細(xì)胞 NIH/3T3 DMEM+10%小牛血清+1%NEAA+1%丙酮酸鈉+1%L-谷氨酰胺+1%P/S 貼壁生長(zhǎng)
小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 OP9 MEMα+20%FBS +1%P/S 貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞培養(yǎng)體系(PriMed-iCell-002)
人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞 iPS *培養(yǎng)基500ml++細(xì)胞消化液500ml+復(fù)蘇專(zhuān)用因子1mg+matrix基質(zhì)膠5ML
人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 Ishikawa MEM+15%FBS+1%NEAA+1%P/S
人正常卵巢上皮細(xì)胞系 IOSE-80(IOSE80;NFHIOSE-80;IOSE80UBC;IOSE-Van; IOSE-VAN) 1640+10%FBS+1%P/S
人胚肺成纖維細(xì)胞 IMR-90 MEM+20%FBS+1%P/S
人急性T細(xì)胞白血病細(xì)胞 J.gamma1 1640+10%FBS+1%P/S
人膀胱移行細(xì)胞癌 J82 MEM+10%FBS+1%P/S
人胎盤(pán)絨毛癌細(xì)胞 JAR 1640+10%FBS+1%丙酮酸鈉+1%P/S
人胰腺癌細(xì)胞 JF-305 1640+10%FBS+1%P/S
人絨毛膜癌細(xì)胞 JEG-3 MEM+10%FBS+1%P/S
人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞 Jurkat(clone E6-1) 1640+10%FBS+1% L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%P/S
人慢性骨髓性白血病細(xì)胞系 K562 IMDM + 10%FBS+1%P/S
人K562耐阿霉素細(xì)胞株 K562/ADR 1640+10%FBS+1%P/S+1ug/mlADR
人口腔表皮癌細(xì)胞 KB MEM+10%FBS +1%P/S
人急性髓性白血病細(xì)胞 KG-1a IMDM + 10%FBS+1%P/S
人卵巢顆粒細(xì)胞瘤細(xì)胞 KGN D/F12+10%FBS+1%P/S
人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞 KNS-89 DMEM +10%FBS+1%P/S
人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞 KU812 1640+10%FBS+1%P/S
人食道癌細(xì)胞 kyse30 48%1640+48%F-12+2%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%P/S
人肝癌細(xì)胞 Li-7 1640+10%FBS+1% L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%P/S
人膠質(zhì)瘤細(xì)胞 LN229 DMEM+5%FBS+1%P/S
人前列腺癌細(xì)胞 LNCaP clone FGC 1640+10%FBS+1% L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉+1%P/S
人結(jié)直腸癌細(xì)胞 lovo F12K+10%FBS+1%P/S
人結(jié)直腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 LOVO+LUC F12K+10%FBS+1%P/S
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 LS174T MEM+10%FBS+1%P/S
人結(jié)直腸癌細(xì)胞 LS180 MEM+10%FBS+1%P/S 該細(xì)胞不能使用胰酶消化
人結(jié)直腸癌細(xì)胞 LS513 1640+10%FBS+1%P/S
人肝星形細(xì)胞 LX-2 1640+10%FBS+1%P/S
人乳腺上皮細(xì)胞 MCF-10A MEGM kit(五管因子)+100ng/ml霍亂毒素(終止消化用刀豆蛋白酶)+1%P/S
人乳腺癌細(xì)胞 MCF-7 MEM+10%FBS+0.01mg/mL胰島素+1%P/S
人乳腺癌阿霉素耐藥細(xì)胞 MCF-7/Adr 1640+10%FBS+0.01mg/mL胰島素+1%PS+500ng/mL ADR
人乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 MCF-7+luc MEM+10%FBS+0.01mg/mL胰島素+1%P/S
人乳腺細(xì)胞 MDA-KB2 L15+10%FBS +1%P/S
人乳腺癌細(xì)胞 MDA-MB-231 L15+10%FBS +1%P/S
人乳腺癌X細(xì)胞+GFP MDA-MB-231+GFP L15+10%FBS+1%P/S
人乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 MDA-MB-231+LUC L15+10%FBS+1%P/S
人乳腺癌細(xì)胞 MDA-MB-361 L15+20%FBS+1%P/S
人黑素瘤細(xì)胞 MDA-MB-435S L15+10%FBS+0.01mg/ml胰島素+0.01mg/ml谷胱甘肽+1%P/S
人乳腺癌細(xì)胞 MDA-MB-436 L15+10%FBS+0.01mg/ml胰島素+16ug/ml谷胱甘肽
人乳腺癌細(xì)胞 MDA-MB-453 L15+10%FBS+1%P/S
人乳腺癌細(xì)胞 MDA-MB-468 L15 +10%FBS+1%P/S
人子宮頸表皮癌細(xì)胞 ME-180 MCCOY'S 5A+10%FBS +1%P/S
人膜間皮細(xì)胞 MET-5A M199+NaHCO3 1.5g/L+3.3 nM EGF+400 nM 氫化的松+20 mM HEPES++1%ITS(10ug/mL胰島素;轉(zhuǎn)鐵蛋白5.5ug/mL; 5ng/mL硒)+10%FBS+1%PS
人骨肉瘤細(xì)胞 MG63 MEM+10%FBS+1%P/S
人胃癌細(xì)胞 MGC-803 1640+10%FBS+1%P/S
人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞 MHCC-97H DMEM+10%FBS+1%P/S
人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 MHCC-97H+luc DMEM+10%FBS+1%P/S
人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞 MHCC-97L DMEM+10%FBS+1%P/S
細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng):
一、污染防控
細(xì)胞培養(yǎng)最基本的是做好污染防控,包括微生物污染的防控和細(xì)胞系間交叉污染的防控。
實(shí)驗(yàn)中需保持良好的操作習(xí)慣,所用材料的位置擺放要順手,污染源和已滅菌物品要分開(kāi)放置。實(shí)驗(yàn)室也需定期清潔與消毒。
二、血清與培養(yǎng)基
通常血清的添加比例為10%,當(dāng)然也可根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)和生長(zhǎng)速率適當(dāng)增加或減少添加比例。在更換血清品牌或者批次時(shí),最好需對(duì)血清的品質(zhì)進(jìn)行驗(yàn)證,防止對(duì)實(shí)驗(yàn)造成影響。
對(duì)于培養(yǎng)基,目前商品化的比較成熟,穩(wěn)定性也較好。如若需自配培養(yǎng)基時(shí),過(guò)濾前攪拌時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)(培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)豐富,細(xì)菌常溫下20min就可繁殖一代,其代謝產(chǎn)物會(huì)對(duì)培養(yǎng)基的品質(zhì)產(chǎn)生影響)。培養(yǎng)基過(guò)濾除菌后,應(yīng)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行無(wú)菌驗(yàn)證,防止污染。
三、細(xì)胞培養(yǎng)瓶
目前商品化的細(xì)胞培養(yǎng)瓶主要為瓶蓋是否帶氣孔兩種。其中不帶透氣孔細(xì)胞培養(yǎng)瓶擰緊后需適當(dāng)回旋瓶蓋,保證CO2能順利進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,對(duì)于適應(yīng)能力強(qiáng)的腫瘤細(xì)胞,可在傳代3-4次后更換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶。對(duì)于非腫瘤細(xì)胞系如293T,HEK293等細(xì)胞,建議每次傳代更換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶來(lái)保證細(xì)胞狀態(tài)。
四、細(xì)胞傳代
正常細(xì)胞形態(tài)較好,輪廓清晰,邊緣透亮,細(xì)胞增殖狀況良好。當(dāng)貼壁細(xì)胞長(zhǎng)到密度90%時(shí),需進(jìn)行傳代。
傳代時(shí)通常使用胰酶消化法。該方法又分為干消化法和濕消化法。
干消化法:胰酶浸潤(rùn)后棄去胰酶,待細(xì)胞變圓后加入新鮮培養(yǎng)基吹下后再進(jìn)行細(xì)胞傳代。
濕消化法:待細(xì)胞變圓,肉眼觀察下成流沙狀脫落時(shí)即可加入新鮮培養(yǎng)基終止消化,1000rpm離心5min,棄去上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸傳代。
吹打細(xì)胞時(shí),手法要輕柔,避免吹打出氣泡,造成細(xì)胞因內(nèi)外壓差破裂,同時(shí)需避免刮到瓶壁影響細(xì)胞的貼壁。
不同細(xì)胞的貼壁能力不同,消化時(shí)間不同;不同細(xì)胞細(xì)胞間連接強(qiáng)度不一樣,消化時(shí)間不同;同一細(xì)胞生長(zhǎng)狀狀況不同,消化時(shí)間不同。消化時(shí)適時(shí)觀察細(xì)胞形態(tài),避免因過(guò)度消化影響細(xì)胞活性。
傳代間隔時(shí)間和傳代比例因細(xì)胞而異。細(xì)胞傳代過(guò)程中,當(dāng)細(xì)胞出現(xiàn)狀態(tài)不好或者污染時(shí)及時(shí)棄去細(xì)胞,重新復(fù)蘇。
五、細(xì)胞凍存與復(fù)蘇
當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況較好或者代數(shù)較早時(shí),需及時(shí)大量的凍存。
細(xì)胞凍存液比例為培養(yǎng)基:血清:DMSO=7:2:1,也可血清:DMSO=9:1。細(xì)胞凍存密度通常為1-3×106個(gè)/ml。細(xì)胞凍存采用慢凍方式,減少冰晶形成,避免細(xì)胞損傷。通常4℃放置0.5 h,-20℃放置2 h,-80℃冰箱中過(guò)夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。
細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)升溫要快,防止在解凍過(guò)程中水分進(jìn)入細(xì)胞,形成冰晶,影響細(xì)胞存活。38℃水浴不時(shí)搖動(dòng),在1分鐘內(nèi)使其*融化,1000rpm離心5min,棄去上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸移入培養(yǎng)瓶中。
細(xì)胞死亡術(shù)語(yǔ):
失巢凋亡:貼壁細(xì)胞中的凋亡,由于缺乏基質(zhì)互作導(dǎo)致的,可能是一個(gè)主要的抑癌機(jī)制。
凋亡,外在途徑:胞外信號(hào)誘導(dǎo)的程序性細(xì)胞死亡,起始于跨膜受體(包括FAS)的連接反應(yīng)。
凋亡,內(nèi)在途徑:程序性細(xì)胞死亡,可能依賴(lài)或不依賴(lài)caspase,特征是線粒體膜電位的改變。
自噬細(xì)胞死亡:細(xì)胞質(zhì)液泡化,伴隨胞質(zhì)內(nèi)容的無(wú)差別分解代謝。
鐵死亡:鐵依賴(lài)、非凋亡、氧化細(xì)胞死亡,由半胱氨酸吸收激發(fā)的。
壞死性凋亡:壞死的程序性形式,特征表現(xiàn)為當(dāng)caspase-8被抑制時(shí),TNFR1通過(guò)RIP1進(jìn)行信號(hào)傳遞。
壞死:不成熟的細(xì)胞死亡,往往發(fā)生于感染或損傷。
依賴(lài)性細(xì)胞死亡:通過(guò)過(guò)量的聚合酶活性消耗ATP和NAD+。
部分拆除/角化:細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的久性修飾,通常依賴(lài)于caspase。比如紅細(xì)胞摘除術(shù)、晶狀體纖維的形成和表皮細(xì)胞角質(zhì)化。
細(xì)胞焦亡:炎癥條件下,caspase-1介導(dǎo)的凋亡,是機(jī)體一種重要的天然免疫反應(yīng),在抗擊感染中發(fā)揮重要作用。
繼發(fā)性壞死:凋亡發(fā)生后的壞死,通常見(jiàn)于細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程。
在日常培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)RAW264.7細(xì)胞容易出現(xiàn)的問(wèn)題主要為以下幾種:1.復(fù)蘇不易成功2.細(xì)胞形態(tài)變異明顯3.消化困難4.細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,當(dāng)你的細(xì)胞培養(yǎng)遇到上述瓶頸,不妨試一試以下幾種解決辦法。
1、復(fù)蘇難以成功
原因:RAW264.7對(duì)空間十分敏感,復(fù)蘇密度太高,細(xì)胞增殖太快,加劇細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)缺失,加速細(xì)胞老化。
解決辦法:T75培養(yǎng)瓶復(fù)蘇細(xì)胞數(shù)量控制在104~105
2、細(xì)胞變異明顯
原因:細(xì)胞吞噬抗原過(guò)多、培養(yǎng)環(huán)境惡劣都會(huì)促使該細(xì)胞呈現(xiàn)梭形、長(zhǎng)梭形
解決辦法:改善細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境,例如與細(xì)胞接觸的玻璃器皿均高溫滅菌,換flask培養(yǎng)瓶,采用一次性器具,使用質(zhì)量較高的胎牛血清
3、消化困難
原因:細(xì)胞老化后,細(xì)胞偽足多且長(zhǎng),使細(xì)胞難消化,使用胰酶或細(xì)胞刮會(huì)對(duì)細(xì)胞損傷較大
解決辦法:無(wú)需胰酶使用吸管重復(fù)吹打,可消化大部分正常狀態(tài)的細(xì)胞;但若細(xì)胞為“長(zhǎng)腳"狀態(tài),即使加入胰酶消化超過(guò)10min,也難以消化下來(lái),勉強(qiáng)消化,對(duì)后續(xù)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)也有較大影響。
4、生長(zhǎng)緩慢
原因:支原體污染會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,甚至難以貼壁
解決辦法:定期進(jìn)行支原體檢測(cè),如發(fā)現(xiàn)支原體污染,即刻使用支原體去除試劑
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