產(chǎn)品名稱：人乳腺細(xì)胞MDA-KB2 (通過(guò)STR)

貨號(hào)：QS-H181

細(xì)胞規(guī)格：1-3×10^6細(xì)胞量

庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨

培養(yǎng)條件：L-15+10% FBS

運(yùn)輸方式：常溫順豐運(yùn)輸和干冰順豐運(yùn)輸

貨 期：復(fù)蘇細(xì)胞需要1-2周，凍存細(xì)胞的需要2-3天（特殊情況會(huì)有說(shuō)明）

質(zhì) 控：無(wú)支原體、無(wú)污染、符合標(biāo)準(zhǔn)

研究范圍：僅供科研使用

人乳腺細(xì)胞MDA-KB2 (通過(guò)STR)   

我司主要經(jīng)營(yíng)產(chǎn)品是國(guó)內(nèi)傳代細(xì)胞和細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的生物試劑。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI無(wú)外泌體血清等高品質(zhì)血清。常規(guī)液體培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、無(wú)血清凍存液、日本三菱產(chǎn)品、ELISA 試劑盒等產(chǎn)品。售后完善，我們以飽滿的熱情歡迎新老客戶選購(gòu)！

我司以客戶為核心，以產(chǎn)品質(zhì)量求生存，以售后服務(wù)求信譽(yù)。我們通過(guò)不斷改進(jìn)來(lái)提高效率，絕不以犧牲品質(zhì)作為代價(jià)。“誠(chéng)信、創(chuàng)新、嚴(yán)謹(jǐn)、專業(yè)”愿以飽滿的熱情期待各界朋友攜手合作，共創(chuàng)輝煌！

一、客戶收到細(xì)胞后需注意事項(xiàng)：

1、收到細(xì)胞，請(qǐng)查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請(qǐng)盡快聯(lián)系。

2、收到細(xì)胞，如包裝完好，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。由于運(yùn)輸途中的影響，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái)，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)不要打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時(shí)左右，讓細(xì)胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理。

3、收到細(xì)胞后，請(qǐng)顯微鏡下觀察細(xì)胞，用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)離心收集細(xì)胞，接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的*培養(yǎng)液，使用進(jìn)口胎牛血清。剛接到細(xì)胞，若細(xì)胞不多時(shí)血清濃度可以提高5％去培養(yǎng)。若細(xì)胞達(dá)到80%左右，血清濃度按照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行調(diào)配。

4、收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。

5、將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過(guò)的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時(shí)之需。

6、24小時(shí)后，細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細(xì)胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn)）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn)，一般1-3分鐘，不超過(guò)5分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁，見(jiàn)細(xì)胞脫落下來(lái)，加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細(xì)胞量多可一傳三，有些細(xì)胞不易傳得過(guò)稀，有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶，以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。（懸浮細(xì)胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。

7、貼壁細(xì)胞，懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無(wú)菌操作。換液時(shí)，換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37℃，5%CO2 培養(yǎng)。    

    血清是一種*培養(yǎng)基，含有細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需的多種營(yíng)養(yǎng)成分，如蛋白質(zhì)、多肽等，多用于細(xì)胞培養(yǎng)、生物制品及診斷試劑的生產(chǎn)。

 

血清的主要成分是蛋白質(zhì)，血清的組成成分與含量常常與供血?jiǎng)游镄詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件有關(guān)。

 

那么如何挑選合適的血清？使用血清時(shí)，需要注意哪些問(wèn)題？現(xiàn)在我們一起來(lái)看看。

二、胎牛血清和新生牛血清

1.取血年齡不同：牛血清按照牛取血時(shí)間或牛齡可進(jìn)行區(qū)分。胎牛血清（Foetal Bovine Serum，簡(jiǎn)稱FBS）指的是取自未出生，母牛剖腹得來(lái)的胎牛。

國(guó)產(chǎn)胎牛血清（并無(wú)明確定義，但通常以此稱）的指的是出生4-6小時(shí)，且未進(jìn)行哺乳進(jìn)食的牛，有時(shí)還稱作國(guó)產(chǎn)新生牛。 

新生牛血清指的是出生14天-3個(gè)月進(jìn)行取血的牛，成年牛血清指的是取血時(shí)牛齡通常超過(guò)12個(gè)月的牛。

以上取血牛齡的差異主要是受當(dāng)?shù)貒?guó)家畜牧業(yè)的發(fā)展及法規(guī)限制影響，因?yàn)榕Ｑ酁樾竽翗I(yè)副產(chǎn)業(yè)，并未有專門為取血而養(yǎng)的牛。

組分與比例不同：這幾種不同牛齡血清所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組分與比例不同。常規(guī)來(lái)說(shuō)，年齡越小的牛血清，細(xì)胞培養(yǎng)效果越好。胎牛血清培養(yǎng)效果好于新生牛，且因?yàn)樘ヅＮ催M(jìn)食過(guò)母乳，所以IgG含量低。

用途與用法不同：根據(jù)細(xì)胞所需生長(zhǎng)條件可確定。

2.如何挑選適合細(xì)胞生長(zhǎng)的血清？

原代或是正常細(xì)胞株建議使用優(yōu)等或特級(jí)胎牛血清，對(duì)生長(zhǎng)條件要求高的細(xì)胞和干細(xì)胞可選用特級(jí)胎牛血清，或胚胎干細(xì)胞胎牛血清。

由于血清有批間差異，細(xì)胞種類不同，我們建議客戶購(gòu)買前可先申請(qǐng)?jiān)囉脴悠?，通過(guò)篩選得到滿意的血清批號(hào)，之后根據(jù)項(xiàng)目需求可進(jìn)行批量囤貨，以保證該項(xiàng)目所需血清質(zhì)量的一致性，可排除不同批號(hào)血清對(duì)于實(shí)驗(yàn)帶來(lái)的影響。

3.如何正確保存血清？

需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃冰箱（未開(kāi)封血清有效期為5年）。若存放于4℃，請(qǐng)勿超過(guò)1個(gè)月，若一次無(wú)法用完一瓶，建議將血清無(wú)菌分裝并冷凍。

4.如何解凍血清？

血清解凍需采用逐步解凍法：將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天，然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過(guò)程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡），減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉(zhuǎn)入37℃解凍，這樣因溫差較大易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)并出現(xiàn)沉淀。

5.需要對(duì)新買的血清進(jìn)行過(guò)濾嗎？

血清在ISO13485認(rèn)證的廠房中生產(chǎn)，經(jīng)過(guò)3次0.1μm過(guò)濾，出廠經(jīng)過(guò)檢測(cè)并且會(huì)使用三種以上的細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)測(cè)試及無(wú)菌檢測(cè)，污染幾率非常低。通常細(xì)胞污染有非常多的可能性，根據(jù)協(xié)助使用者進(jìn)行分析檢測(cè)，結(jié)果表明絕大部分都是因人為操作失誤導(dǎo)致污染。因此買來(lái)的血清不需要再次進(jìn)行過(guò)濾。

6.除了對(duì)血清進(jìn)行檢測(cè)，有何更直觀的方式分辨血清質(zhì)量？

目測(cè)法，我們可根據(jù)血清的顏色，沉淀，澄清度等進(jìn)行區(qū)分。

顏色：顏色根據(jù)血清蛋白含量的不同，可表現(xiàn)出黃色或者紅色。進(jìn)口血清質(zhì)量較好的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色，較差質(zhì)量呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。熱滅活血清或保存不當(dāng)?shù)?，由于血紅蛋白的破壞氧化，會(huì)呈現(xiàn)出暗紅色，甚至咖啡色。

沉淀：血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生。沉淀產(chǎn)生的原因很多，使用時(shí)反復(fù)凍融會(huì)增加沉淀。進(jìn)口血清過(guò)濾分裝前很少反復(fù)凍融，因此成品清澈。

澄清度：進(jìn)口血清是由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低，表現(xiàn)為稀薄、清淡。國(guó)產(chǎn)血清絕大多數(shù)為新生牛血清，相對(duì)而言更加粘稠，顏色略深。

7.為何血清會(huì)存在批間差？如何避免此影響？

因?yàn)檠鍋?lái)源于動(dòng)物，其組成成分有1000種左右，每個(gè)批號(hào)的組分和組分含量都是不固定的，因此批間差異是可能存在的。

為了避免批間差異對(duì)細(xì)胞的影響，建議先進(jìn)行批號(hào)測(cè)試，篩選合適的批號(hào)，備好庫(kù)存（血清未開(kāi)封時(shí)，在-20℃下可保存5年）。如需更換血清批次或產(chǎn)地，建議先試用后再大量訂購(gòu)。

8.血清中沉淀是什么成分？造成原因有哪些？如何預(yù)防和處理沉淀？

血清中沉淀主要有：纖維蛋白（絮狀沉淀），甲胎蛋白，脂蛋白，冷凝集素，玻粘連蛋白，磷酸鈣[1]（顯微鏡下小黑點(diǎn)沉淀），膽固醇等。

原因：造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活，反復(fù)凍融，長(zhǎng)期儲(chǔ)存于2-8℃或者室溫。

預(yù)防措施與建議：因此不立即使用的血清應(yīng)保存在-20℃或以下。

9.血清為何要熱滅活，有必要對(duì)所有血清都滅活嗎？如何正確的進(jìn)行滅活？

加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。啟動(dòng)的補(bǔ)體系統(tǒng)參與溶解細(xì)胞事件，刺激平滑肌收縮，細(xì)胞和血小板釋放組胺，啟動(dòng)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞活化。在免疫學(xué)研究中，培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲(chóng)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí)，推薦使用熱滅活血清。

實(shí)驗(yàn)顯示，熱滅活血清對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的，對(duì)于非必須的細(xì)胞來(lái)說(shuō)血清滅活對(duì)于細(xì)胞生長(zhǎng)只有微小甚至無(wú)任何作用，還可能造成生長(zhǎng)速率降低，沉淀物還會(huì)顯著增多，不利于細(xì)胞觀察。因此，若非必須，不需要對(duì)血清進(jìn)行滅活處理。

將需要進(jìn)行處理的血清置于56℃水浴30min，建議加放空白對(duì)照（同體積水）使用溫度計(jì)測(cè)溫，以測(cè)得溫度為56℃時(shí)為計(jì)時(shí)起始點(diǎn)，加熱中可不時(shí)輕度旋轉(zhuǎn)混勻血清。

Hyclone胎牛血清FBS SH30084.03 AUSTRALIA 500ML

Hyclone優(yōu)等胎牛血清FBS SH30406.05 New Zealand 500ML

Hyclone特級(jí)胎牛血清FBS SH30396.03 Canada 500ML

Hyclone特級(jí)胎牛血清FBS SH30070.03 USA 500ML

Hyclone活性炭/葡聚糖處理 SH30068.03 USA 500ML

Hyclone馬血清      SH30074.03 USA 500ML

Hyclone烏拉圭胎牛血清 SV30087. 03 Uruguay 500ML

Hyclone標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清  SH30071.03 USA 500ML

Hyclone優(yōu)等胎牛血清  SV30160.03 SOUTH AMERICA 500ML

Hyclone新生牛血清 SH30413.02 New Zealand 500ML

SERANA胎牛血清FBS S-FBS-SA-015 SOUTH AMERICA 500ML

SERANA胎牛血清FBS S-FBS-EU-015 SOUTH AMERICA 500ML

SERANA胎牛血清FBS S-FBS-US-015 USA 500ML

SERANA胎牛血清FBS S-FBS-AU-015 AUSTRALIA 500ML

SERANA超低IgG胎牛血清 S-FBS-SA-055 SOUTH AMERICA 500ML

SERANA透析胎牛血清Dialyzed FBS S-FBS-US-065 USA 500ML

SERANA活性炭/葡聚糖處理 S-FBS-AU-045 AUSTRALIA 500ML

BOVOGEN胎牛血清FBS SFBS SOUTH AMERICA 500ML

BOVOGEN胎牛血清FBS SFBS New Zealand 500ML

BOVOGEN胎牛血清FBS SFBS AUSTRALIA 500ML

BOVOGEN新生牛血清   New Zealand 500ML

PAA 普通胎牛血清FBS A15-101 EU 500ML

PAA 優(yōu)等胎牛血清FBS A15-151 EU 500ML

BI優(yōu)等胎牛血清 04-001-1ACS SOUTH AMERICA 500ML

BI ES級(jí)別胎牛血清 04-002-1A SOUTH AMERICA 500ML

BI 間充質(zhì)干細(xì)胞胎牛血清 04-400-1A SOUTH AMERICA 500ML

Corning康寧優(yōu)等胎牛血清 35-076-CV AUSTRALIA 500ML

PAN胎牛血清FBS P30-3302 SOUTH AMERICA 500ML

PAN胎牛血清FBS ST30-3302 SOUTH AMERICA 500ML

PAN ES級(jí)別胎牛血清 ST30-2602 SOUTH AMERICA 500ML

PAN胎牛血清FBS Plus ST30-3302P SOUTH AMERICA 500ML

NTC優(yōu)等胎牛血清 SFBE 阿根廷 500ML

Gemini優(yōu)等胎牛血清 900-108 SOUTH AMERICA 500ML

Gemini特級(jí)胎牛血清 100-500 USA 500ML

Gemini科研用人AB血清 100-512 USA 100ML

TCB胎牛血清 101ZC New Zealand 500ML

Sigma 特級(jí)胎牛血清 F2442 USA 500ML

Sigma正常人AB血清 H4522 USA 100ML

SBI 無(wú)外泌體血清 EXO-FBS-50A-1 USA 50ML

GIBCO 雙抗 15140-122 100ml

GIBCO 胰酶 25200-056 100ml

GIBCO 胰酶 25200-072 500ml

DMEM高糖培養(yǎng)基 C11995500BT 500ml

DMEM低糖培養(yǎng)基 C11885500BT 500ml

PBS C10010500BT 500ml

1640培養(yǎng)基 C11875500BT 500ml

DMEM/F12 C11330500BT 500ml

MEM C11095500BT 500ml

α-MEM C12571500BT 500ml

HyClone 雙抗 SV30010 100ml

HyClone 胰酶 SH30042.01 100ml

DMEM低糖 SH30021.01 500ml

DMEM高糖（不含丙酮酸鈉） SH30022.01 500ml

DMEM/F-12 1:1 SH30023.01 500ml

MEM/EBSS SH30024.01 500ml

IMDM SH30228.01 500ml

DMEM高糖（含丙酮酸鈉） SH30243.01 500ml

M199/EBSS SH30253.01 500ml

PBS緩沖液 SH30256.01 500ml

α-MEM SH30265.01 500ml

改良型RPMI-1640 SH30809.01 500ml

DPBS SH30028.02 500ml

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