PAN胎牛血清是我們進行細胞培養(yǎng)過程種會用到的一種輔助材料,血清滅活是指在56℃的環(huán)境溫度種對已經*解凍的血清進行30分鐘的加熱操作,這是細胞培養(yǎng)過程中很多人都十分感興趣的話題,但是卻一頭霧水,今天蘇州千舍生物科技有限公司針對這個問題給你一次性解答。
1、細胞培養(yǎng)過程總加入的血清必須要進行滅活操作嗎?
蘇州千舍:不是必須的,要根據(jù)具體的實驗要求判定血清是否要進行滅活操作。
2、PAN胎牛血清滅活的條件是56℃ 30分鐘嗎?
蘇州千舍:如果用于培養(yǎng)大多數(shù)的腫瘤細胞,血清一般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長因子。 但是如果用于培養(yǎng)一些表面具有補體受體的細胞,如內皮細胞,血清是 需要滅活,一般是56℃,30min。
3、胎牛血清在做滋養(yǎng)細胞培養(yǎng)要進行滅活嗎?
蘇州千舍:進口的一般都已滅活,國產的不一定,滅活之后使用會更安全。
4、病毒上清轉染細胞,培養(yǎng)用的血清需要滅活嗎?血清中的補體和抗體會不會被傳染?
蘇州千舍:血清一定要滅活,可以先用無血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時以后再加血清。避免雜蛋白對病毒和宿主結合過程的干擾,一般是2-6小時,根據(jù)細胞的狀態(tài)決定。這要根據(jù)實際情況而定,如果沒有把握那就滅活吧,也不麻煩56度半個小時。
5、胎牛血清直接解凍后就可以加入到培養(yǎng)基中是嗎?
蘇州千舍:常規(guī)滅活建議的溫度在45℃到62℃之間, 而時間則從15分鐘到60分鐘不等。其中常用的手法是56℃熱處理30 分鐘。隨著血清采集、處理、加工工藝的提高 ,許多早先認為是熱滅活的原因已經不再成立,只有少數(shù)對血清進行熱滅活的研究者在實驗中證實了這一步驟的有效性和必要性。在正常的操作下,熱滅活通常對細胞的生長沒有明顯的促進作用。同時還要考慮血清滅活與否對后續(xù)的實驗有沒有影響。
6、分裝后的PAN胎牛血清從-20℃取出放4℃讓其液化,卻見血清比較混濁,有沉淀產生,這屬正常嗎?
蘇州千舍:正常。