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細(xì)胞培養(yǎng)常見問題的解答
1.何時(shí)須更換培養(yǎng)基？
視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本資料上之更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。
2.可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活。
3.如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基？
培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng)。總之，選MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、 RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開始。
4.培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)應(yīng)使用5 %或10% CO2？或根本沒有影響？
一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng)，而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7 g時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用10 % CO2；當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5 g時(shí)，則應(yīng)使用5 % CO2培養(yǎng)細(xì)胞。
5．冷凍管應(yīng)如何解凍？
取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管之爆裂。
6.怎樣離心回收細(xì)胞？
欲回收動(dòng)物細(xì)胞，其離心速率一般為300xg (約1000rpm)，5 - 10分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細(xì)胞死亡。
7.細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？
動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存時(shí)經(jīng)常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5 - 10 %DMSO (dimethyl sulfoxide)和90 - 95 %原來細(xì)胞生長(zhǎng)用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于 DMSO稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中，必須使用前先行配制完成。
8.應(yīng)如何避免細(xì)胞污染？
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染的好方法。
9.購買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？
研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可。
10.購買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？
研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。 培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久。
11.什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅？
酚紅在培養(yǎng)基中用作PH值的指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色。研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素的作用，（特別是雌激素）。為避免固醇類反應(yīng)，培養(yǎng)細(xì)胞，尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí)，用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測(cè)，一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí)，不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
蘇州千舍生物細(xì)胞庫細(xì)胞明細(xì)
| 293(HEK-293) | 人胚腎細(xì)胞 |
| 5637 | 人膀胱癌細(xì)胞 |
| 293A | 人胚腎細(xì)胞 |
| 22RV1 | 人前列腺癌細(xì)胞 |
| 293T | 人胚腎細(xì)胞 |
| 3T3-L1 | 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 |
| 4T1 | 小鼠乳腺癌細(xì)胞 |
| 6T-CEM | 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞 |
| 769-P | 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 |
| 786-O(786-0) | 人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞 |
| 95-D | 人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 |
| A172 | 人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 |
| A2780 | 人卵巢癌細(xì)胞 |
| A-375 | 人惡性黑色素瘤細(xì)胞 |
| A-431 | 人表皮癌細(xì)胞 |
| A549 | 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 |
| A-673 | 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 |
| A9 | 小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞 |
| AAV-293 | 人胚腎細(xì)胞 |
| Acc-2 | 人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞 |
| ACHN | 人腎癌細(xì)胞 |
| AGS | 人胃腺癌細(xì)胞 |
| Ana-1 | 小鼠巨噬細(xì)胞 |
| Anglne | 人卵巢癌細(xì)胞 |
| AR42J | 大鼠胰腺外分泌細(xì)胞 |
| ARPE-19 | 人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞 |
| AsPC-1 | 人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞 |
| AtT-20 | 小鼠垂體瘤細(xì)胞 |
| B16 | 小鼠黑色素瘤細(xì)胞 |
| Bcap-37 | 人乳腺癌細(xì)胞 |
| BEL-7402 | 人肝癌細(xì)胞 |
| BEL-7404 | 人肝癌細(xì)胞 |
| BGC-823 | 人胃癌細(xì)胞 |
| BHK-21 | 倉鼠腎細(xì)胞 |
| BIU-87 | 人膀胱癌細(xì)胞 |
| BRL 3A | 大鼠正常肝細(xì)胞 |
| BNL CL.2 | 小鼠胚胎肝細(xì)胞 |
| BRL | 大鼠肝細(xì)胞 |
| BS-C-1 | 非洲綠猴腎細(xì)胞 |
| BT-474 | 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 |
| BT-549 | 人乳腺管癌細(xì)胞 |
| BxPC-3 | 人原位胰腺腺癌細(xì)胞 |
| C127 | 小鼠乳腺癌細(xì)胞 |
| C2C12 | 小鼠成肌細(xì)胞 |
| C-33 A | 人子宮頸癌細(xì)胞 |
| C4-2 | 人前列腺癌細(xì)胞 |
| C6 | 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 |
| Ca Ski | 人宮頸癌腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞/人宮頸癌上皮細(xì)胞 |
| CA46 | 人Burkitts淋巴瘤細(xì)胞 |
| Caco-2 | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 |
| CaES-17 | 人食管癌細(xì)胞 |
| Caki-1 | 人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞 |
| Calu-1 | 人肺癌細(xì)胞 |
| Calu-3 | 人肺腺癌細(xì)胞 |
| Caov-3 | 人乳突狀卵巢腺癌細(xì)胞 |
| CCD-1095Sk | 人乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞 |
| L2 | 大鼠肺泡上皮細(xì)胞 |
| CCRF-CEM | 人急性淋巴白血病細(xì)胞 |
| CFPAC-1 | 人胰腺癌細(xì)胞 |
| CHL | 倉鼠肺細(xì)胞 |
| CHO | 倉鼠卵巢細(xì)胞 |
| CHO-K1 | 倉鼠卵巢細(xì)胞亞株 |
| CNE | 人鼻咽癌細(xì)胞 |
| CoC1 | 人卵巢癌細(xì)胞 |
| CoC1/DDP | 人卵巢癌細(xì)胞CoC1順鉑耐藥亞株 |
| COLO 205 | 人結(jié)腸癌細(xì)胞 |
| COLO 320DM | 人結(jié)腸癌細(xì)胞 |
| COS-1 | 非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞 |
| COS-7 | 非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞 |
| CRFK | 貓腎細(xì)胞 |
| CT26.WT | 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞 |
| Daudi | 人淋巴瘤細(xì)胞 |
| DH82 | 犬巨噬細(xì)胞(狗腎惡性組織細(xì)胞增生癥細(xì)胞) |
| DLD-1 | 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 |
| DU 145 | 人前列腺癌細(xì)胞 |
| EAC | 小鼠艾氏腹水癌細(xì)胞 |
| Eca-109 | 人食管癌細(xì)胞 |
| EL4 | 小鼠淋巴瘤細(xì)胞 |
| ES-2 | 人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞 |
| WB-F344 | 大鼠肝上皮樣干細(xì)胞 |
| F81 | 貓腎細(xì)胞 |
| F9 | 小鼠畸胎瘤細(xì)胞/小鼠胚胎癌細(xì)胞 |
| FaDu | 人咽鱗癌細(xì)胞 |
| FRhK-4 | 恒河猴胚腎細(xì)胞 |
| GBC-SD | 人膽囊癌細(xì)胞 |
| GNM | 人口腔鱗癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞 |
| H4 | 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 |
| H-4-II-E | 大鼠肝細(xì)胞瘤 |
| H9c2(2-1) | 大鼠胚胎心肌細(xì)胞 |
| Hacat | 人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞 |
| HBL-100 | 人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞 |
| HBZY-1 | 大鼠腎小球系膜細(xì)胞 |
| HCC1937 | 人乳腺癌細(xì)胞 |
| HCC827 | 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 |
| HCCC-9810 | 人肝內(nèi)膽管癌細(xì)胞 |
| HCT 116 | 人結(jié)腸癌細(xì)胞 |
| HCT-15 | 人結(jié)腸癌細(xì)胞 |
| HCT-8 | 人盲腸腺癌細(xì)胞 |
| HEC-1-A | 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 |
| HEC-1-B | 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞 |
| HeLa | 人宮頸癌細(xì)胞 |
| Hep 3B(Hep 3B2.1-7) | 人肝癌細(xì)胞 |
| Hep G2 | 人肝癌細(xì)胞 |
| HEp-2 | 人喉表皮癌細(xì)胞 |
| Hepa 1-6 | 小鼠肝癌細(xì)胞 |
| HFL1 | 人胚肺成纖維細(xì)胞 |
| HGC-27 | 人胃癌細(xì)胞（未分化） |
| HIC | 人小腸癌細(xì)胞 |
| HK-2 | 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞 |
| HL-60 | 人早幼粒急性白血病細(xì)胞 |
| HL-7702(L-02) | 人肝正常細(xì)胞 |
| HMy2.CIR | 人B淋巴母細(xì)胞 |
| HO-8910 | 人卵巢癌細(xì)胞 |
| Hs 578T | 人乳腺癌細(xì)胞 |
| Hs-746T | 人胃癌細(xì)胞 |
| HSC-T6 | 大鼠肝星形細(xì)胞 |
| HT-1080 | 人纖維肉瘤細(xì)胞 |
| HT-29 | 人結(jié)腸癌細(xì)胞 |
| HuH-6 | 人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞 |
| HuH-7 | 人肝癌細(xì)胞 |
| HuT 102 | 人T淋巴瘤細(xì)胞 |
| HUVEC(HUV-EC-C) | 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 |
| IBRS-2 | 豬腎細(xì)胞 |
| IMR-32 | 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 |
| J82 | 人膀胱移行細(xì)胞癌 |
| JAR | 人胎盤絨毛膜癌細(xì)胞 |
| JEG-3 | 人絨毛膜癌細(xì)胞 |
| JeKo-1 | 人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 |
| Jurkat, Clone E6-1 | 人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞/人淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞 |
| K-562 | 人慢性骨髓性白血病細(xì)胞 |
| KB | 人口腔表皮樣癌細(xì)胞 |
| KG-1 | 人急性骨髓性白血病細(xì)胞 |
| KLE | 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 |
| KU812 | 人外周血嗜堿性白血病細(xì)胞 |
| L1210 | 小鼠白血病細(xì)胞 |
| L6 | 大鼠成肌細(xì)胞 |
| NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L] | 小鼠成纖維細(xì)胞 |
| Lec1 | 倉鼠卵巢細(xì)胞 |
| Li-7 | 人肝癌細(xì)胞 |
| LLC | 小鼠肺癌細(xì)胞 |
| LLC-MK2 | 恒河猴腎細(xì)胞 |
| LM/TK(LMTK-) | 小鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞 |
| Lncap clone FGC | 人前列腺癌細(xì)胞 |
| LoVo | 人結(jié)腸癌細(xì)胞 |
| LS 174T | 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 |
| LTEP-a-2 | 人肺腺癌細(xì)胞 |
| MA-782 | 小鼠乳腺癌細(xì)胞 |
| MADB106 | 大鼠乳腺癌細(xì)胞 |
| MCF-7 | 人乳腺癌細(xì)胞 |
| MDA-MB-231 | 人乳腺癌細(xì)胞 |
| MDA-MB-435S | 人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 |
| MDA-MB-453 | 人乳腺癌細(xì)胞 |
| MDBK(NBL-1) | 牛腎細(xì)胞 |
| MDCK(NBL-2) | 犬腎細(xì)胞 |
| ME-180 | 人子宮頸表皮癌細(xì)胞 |
| MFC | 小鼠胃癌細(xì)胞 |
| MG-63 | 人骨肉瘤細(xì)胞 |
| MGC80-3 | 人胃癌細(xì)胞 |
| MLTC-1 | 小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞 |
| MOLT-4 | 人急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞 |
| MRC-5 | 人胚肺成纖維細(xì)胞 |
| MS1 | 小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞 |
| MSTO-211H | 人肺癌細(xì)胞株 |
| NAMALWA | 人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞 |
| NCI-H1299 | 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 |
| NCI-H1650 | 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 |
| NCI-H292 | 人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移) |
| Neuro-2a[N2a] | 小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞 |
| NCI-N87 | 人胃癌細(xì)胞 |
| NG108-15[108CC15] | 小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞 |
| NIH/3T3 | 小鼠胚胎細(xì)胞 |
| NR8383 | 大鼠肺泡巨噬細(xì)胞 |
| NRK | 正常大鼠腎細(xì)胞 |
| NRK-52E | 大鼠腎小管導(dǎo)管上皮細(xì)胞 |
| OK | 負(fù)鼠腎小管細(xì)胞 |
| OP9 | 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞 |
| OS-RC-2 | 人腎癌細(xì)胞 |
| OVCAR-3 | 人卵巢癌細(xì)胞 |
| P19 | 小鼠畸胎瘤細(xì)胞 |
| P388D1 | 小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞 |
| P3X63Ag8 | 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 |
| P815 | 小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞 |
| PA317 | 小鼠成纖維細(xì)胞 |
| PANC-1 | 人胰腺癌細(xì)胞 |
| PC-3 | 人前列腺癌細(xì)胞 |
| PIEC | 豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 |
| PK-15 | 豬腎細(xì)胞 |
| QGY-7701 | 人肝癌細(xì)胞 |
| Raji | 人Burkitt's淋巴瘤細(xì)胞 |
| RAW 264.7 | 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 |
| RBE | 人肝膽管癌細(xì)胞 |
| RBL-2H3 | 大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞 |
| RD | 人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞 |
| RF/6A | 猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞 |
| RH-35 | 大鼠肝癌細(xì)胞 |
| RKO | 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 |
| RL95-2 | 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 |
| RM-1 | 小鼠前列腺癌細(xì)胞 |
| RSC96 | 大鼠雪旺細(xì)胞 |
| RWPE-1 | 人前列腺上皮細(xì)胞 |
| S-180 | 小鼠腹水瘤細(xì)胞/小鼠肉瘤細(xì)胞 |
| Saos-2 | 人成骨肉瘤細(xì)胞 |
| SCaBER | 人膀胱鱗癌細(xì)胞 |
| Sf21 | 昆蟲卵巢細(xì)胞 |
| Sf9 | 昆蟲卵巢細(xì)胞 |
| SGC-7901 | 人胃癌細(xì)胞 |
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